Выдержка из текста работы
- ВВЕДЕНИЕ 2
- 1. Структура мембранных белков 3
- 2. Выделение мембранных белков. 6
- 2.1 Солюбилизация мембранных белков 7
- 2.1.1 Периферические белки 7
- 3. Характеристика очищенных интегральных мембранных белков 10
- 3.1 Определение молекулярной массы субъединиц (электрофорез в ПААГ) 10
- 3.2 Определение молекулярной массы нативного белка с помощью гидродинамических методов 11
- 3.3 Метод радиационной инактивации 12
- 3.4 Спектральные методы 13
- 3.4.1 Метод кругового дихроизма 14
- 3.4.2 Инфракрасная спектроскопия и спектроскопия комбинационного рассеяния 15
- 3.4.3 ЯМР-спектроскопия 16
- 3.5 Определение ферментативной активности 16
- 3.6 Изучение стехиометрии субъединиц 17
- 3.7 Изучение трехмерной структуры с помощью рентгеновской дифракции и реконструкции изображения 18
- 3.7.1 Кристаллизация мембранных белков 18
- 3.7.2 Реконструкция изображения и двумерные кристаллы 20
- 4. Пример структурных исследований мембранных белков. 21
- 4.1 Структура поринов 21
- Заключение 24
- Список литературы 25
ВВЕДЕНИЕ
1. Структура мембранных белков
2. Выделение мембранных белков
2.1 Солюбилизация мембранных белков
2.1.1 Периферические белки
В зависимости от задачи, которая стоит перед исследователем, мембрана может быть подвергнута мягкой или жесткой обработке
2.1.2 Интегральные белки
3. Характеристика очищенных интегральных мембранных белков
3.1 Определение молекулярной массы субъединиц (электрофорез в ПААГ)
3.2 Определение молекулярной массы нативного белка с помощью гидродинамических методов
3.3 Метод радиационной инактивации
3.4 Спектральные методы
3.4.1 Метод кругового дихроизма
3.4.2 Инфракрасная спектроскопия и спектроскопия комбинационного рассеяния
Эти методы не только позволяют получить сведения о конфор
3.4.3 ЯМР-спектроскопия
Этот метод также может использоваться для изучения мембранных белков
3.5 Определение ферментативной активности
3.6 Изучение стехиометрии субъединиц
3.7 Изучение трехмерной структуры с помощью рентгеновской дифракции и реконструкции изображения
3.7.1 Кристаллизация мембранных белков
Наиболее детальную структурную информацию об очищенных мембранных белках можно получить, исследуя методом рентгеновской дифракции трехмерные белковые кристаллы
3.7.2 Реконструкция изображения и двумерные кристаллы
Трехмерные кристаллы мембранных белков получить очень трудно, но многие из них образуют двумерные упорядоченные структуры
4. Пример структурных исследований мембранных белков.
4.1 Структура поринов
Заключение